Trypsin-EDTA محلولی آنزیمی–شلاتهکننده است که برای جدا کردن و برداشت سلولهای چسبنده از سطح فلاسک یا پلیت کشت استفاده میشود. تریپسین یک پروتئاز وابسته به سرین است که زنجیرههای پپتیدی پروتئینهای اتصالدهنده سلول–به–سلول و سلول–به–بستر را هیدرولیز میکند. در ترکیب با EDTA (اتیلندیآمین تترااستیک اسید)، یونهای کلسیم و منیزیم که برای پایدارسازی اتصالات سلولی ضروری هستند، شلاته میشوند؛ این امر کارکرد تریپسین را در جداسازی سلولها تقویت میکند.
محلول Trypsin-EDTA معمولاً در غلظتهای 0.25% یا 0.05% تریپسین همراه با 0.53 mM EDTA تهیه و تحت فیلتر استریل (0.22 μm) آمادهسازی میشود. این ماده برای جلوگیری از تغییرات فنوتیپی یا آسیب سلولی، باید در مدت کوتاه و در دمای مناسبی (معمولاً 37°C) استفاده شود و پس از مشاهده جدا شدن سلولها، با محیط کشت حاوی سرم یا محلول خنثیکننده، فعالیت آن متوقف گردد.
1,500,000 تومان
ویژگیها:
کاربردها:
Fetal Bovine Serum (FBS) یکی از رایجترین و پرکاربردترین مکملهای محیط کشت سلولی است که از خون جنین گاو استخراج میشود. این ماده به دلیل ترکیب غنی از فاکتورهای رشد، هورمونها، پروتئینها، اسیدهای آمینه و مواد مغذی ضروری، شرایط ایدهآلی برای رشد و تکثیر انواع سلولهای حیوانی و انسانی در کشت in vitro فراهم میکند.
FBS فاقد بسیاری از آنتیبادیها و ایمونوگلوبولینهای موجود در سرم بالغ است، به همین دلیل از نظر کاهش پاسخ ایمنی و تداخل با آزمایشها، مناسبتر از سایر انواع سرمها است. پس از جمعآوری، سرم تحت فرایندهای فیلتراسیون استریل (0.1 μm) و تستهای کنترل کیفیت برای اطمینان از عدم آلودگی میکروبی و ویروسی قرار میگیرد.
Pen-Strep ترکیبی از دو آنتیبیوتیک رایج پنیسیلین و استرپتومایسین است که به عنوان مکمل ضدباکتری در محیطهای کشت سلولی استفاده میشود.
پنیسیلین نوعی β-لاکتام است که با مهار سنتز دیواره سلولی باکتریهای گرممثبت، مانع رشد آنها میشود. استرپتومایسین یک آمینوگلیکوزید است که با اتصال به زیرواحد 30S ریبوزوم باکتری، ترجمه پروتئین را مختل کرده و طیف وسیعی از باکتریهای گرممنفی را مهار میکند.
محلول Pen-Strep معمولاً حاوی 10,000 units/mL پنیسیلین و 10 mg/mL استرپتومایسین است که با آب یا بافر استریل تهیه و تحت فیلتراسیون استریل قرار میگیرد. این ترکیب مانع رشد بیشتر آلودگیهای باکتریایی در کشتهای سلولی شده و پایداری و خلوص محیط کشت را حفظ میکند.
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.